微卫星多重PCR技术在水产动物中应用广泛,主要用于亲子鉴定和遗传多样性检测。日本对虾广泛分布于印度洋,西太平洋地区,以及日本沿海和我国东南沿海等海域均有分布,是我国沿海地区重要的养殖对象。利用分子标记辅助是日本对虾良种选育的重要途径之一,目前微卫星为广泛应用的一种分子标记。微卫星广泛分布于基因组中,多态性高,稳定性好,共显性遗传。广泛应用于系谱鉴定、个体识别、遗传多样性检测等诸多领域。常规微卫星检测技术为单引物常规PCR,效率低,而多重PCR在同一反应中同时扩增多个位点,极大提高了效率,减少样品浪费,加快了检测进程,大大节约了实验成本等优点。本技术所解决的技术问题是提供一种日本对虾微卫星标记的三重PCR检测方法,该技术在大量微卫星分子标记的基础上构建了一个三重PCR检测体系及检测程序,实现了在一个PCR反应中同时检测3个微卫星位点,与常规PCR方法相比效率提高了3倍,所得结果可同时反映日本对虾多个微卫星位点的遗传多态性,为日本对虾分子标记辅助选择育种提供高效而准确的微卫星检测技术。
该技术可应用于日本对虾育种中的亲虾选育,水产养殖过程中的品种监测,日本对虾产品质量检测,特别是遗传多样性的检测与家系选育中的亲虾选择,可提高3倍的选择效率。
日本对虾多重PCR技术可以在一个反应体系中同时扩增多个目的片段,具有高特异性、高灵敏度、高效率、低成本的特点,适合大量样本的分析与鉴定。
1.高效性:可在同一PCR反应管内同时对多个目的基因进行分型。
2.高效率:该多重PCR技术可提高三倍的工作效率。
3.经济性:可同时检出多个位点,大大节省时间,节省试剂,节约经费开支。